无惧集采！速度更快，成本更低，流式细胞技术新突破！全球首创自主研发流式试剂产品引爆市场！

这几日，IVD行业迎来大“地震”。

一直以为会是特列的IVD带量采购，终于还是来了，而且第一刀就砍向了如日中天的化学发光。

8月19日，安徽省公立医疗机构临床检验试剂集中带量采购谈判议价公告一经发布，大批医疗企业市值开始出现跳水式下跌。

受此影响，而被预判为下一个风口的流式细胞仪和相关试剂，或将加快崛起。

流式细胞技术(Flow Cytometry, FCM)是一种可以快速、准确、客观地同时检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性，并加以定量的技术。具有高通量、速度快、精度高、准确性好等优点。

流式细胞分析正是采用这一技术，普遍应用于免疫学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等临床医学和基础医学研究领域，同时也可以应用于外周血内皮细胞测定、调节性T细胞等尖端领域。

临床流式细胞分析 (clinical flow cytometry)是将流式细胞分析技术与方法应用于临床医学，密切与临床疾病的诊断、分型、治疗、预后及预防等相结合的最新应用学科。流式细胞分析几乎可对各种组织及细胞进行检测，包括各种细胞的相对计数、绝对计数，以及细胞膜、细胞质和细胞核中各种抗原分子的定性及定量分析等。

最近，一种快捷方便的T细胞克隆性分析工具——TRBC1检测试剂的诞生，使得流式细胞术在检测成熟T细胞肿瘤方面有了很大的进展。

TRBC1抗体是由河南凯普瑞生物技术有限公司全球首创，自主研发的流式试剂产品。所用的JOVI.1是一种CAR-T疗法治疗T细胞淋巴瘤的抗体，TRBC1在健康外周血和外周血T细胞淋巴瘤中的表达有着显著性差异。研究表明，25%—47%的外周血T细胞表达TRBC1。 

最近，几家领先的临床实验室展示了JOVI.1 抗体用于克隆性评估的重要数据，证明了与基于NGS的TCR γ PCR或Vbeta repertoire分析相比，流式细胞术检测TRBC1具有相似的敏感性和特异性，但速度更快且成本更低。

TRBC1检测可以提供T细胞及T细胞免疫表型亚群的克隆性的实时信息。在所有的检测标本中，包括外周血、骨髓、淋巴结，以及组织和体液，都可以将TRBC1表达受限 (单一型) 的肿瘤T细胞群与非肿瘤T细胞区分开。

成熟T细胞肿瘤是一种异质性疾病，占非霍奇金淋巴瘤的10%-15%，其特征是克隆性T细胞的恶性扩增。常用的实验室诊断方法有病理学诊断、TCR基因重排、TCRs二代测序、TCRvβ分析等。

但每种方法都有一定的优缺点，如TCR基因重排通常用于证实T细胞克隆性，但在正常衰老和多种良性炎症条件下容易出现假阳性结果。TCRs二代测序的方法具有更高的分辨率和分析灵敏度，但非常复杂、昂贵，通常不用于常规的诊断实践。TCRVβ分析提供了一种检测克隆性TCR细胞的免疫表型方法，但劳动密集型，昂贵，难以解释，敏感性有限。

流式细胞术检测方法中的TCRVβ受体库试剂盒共有24个亚基，覆盖了大概70%的T细胞克隆，如果以单个亚基≥40%为临界值，灵敏度为93%；如果以单个亚基≥60%为临界值，灵敏度为近100%；如果TCRVβ总和明显减低，即＜30%，则间接提示单克隆表达。由于某些免疫反应中也会出现T细胞的克隆性增生，即使FCM检测到克隆性细胞存在，也要结合临床确定其是否为肿瘤性。

 

FCM检测中加入TRBC1这个新抗体，无疑是为T细胞肿瘤的诊断锦上添花。但实际应用中，在通过TRBC1表达模式评估克隆性时，需要采用定量和定性结合的分析策略，需要更多的、更加全面的含有TRBC1的T细胞panel来评估分析敏感性。

对于不容易被识别为肿瘤细胞的，可能需要详细分析不同免疫表型的T淋巴细胞TRBC1的表达。TRBC1在所有健康供者血液中的表达都是多型性的。TRBC1+ 与TRBC1- T细胞的比值大约在1:1—1:2之间 (图1)。

TRBC1的阳性率＞85%或者＜15%可能适合定义克隆性，但对于T淋巴瘤的诊断，FCM表型需要具有显著的肿瘤负荷（32%-97%的淋巴细胞）和可检测到的异常免疫表型。在没有任何其他免疫表型异常的情况下，临界值的百分比增加，在解释时需要谨慎。在设计panel时，可以通过显示CD3+ TCRγδ-来适当的识别TCRαβ细胞。在解释CD8+的T-CUS的克隆性时需要谨慎。最后，TRBC1不适用TCRγδ-T细胞以及CD3-的细胞（如正常胸腺细胞、CD3阴性肿瘤和非常罕见的CD3阴性小反应亚群）克隆性评估。

 

TRBC1 (JOVI.1克隆) FITC对活性T细胞和肿瘤T细胞克隆性的比较。左:反应性T细胞呈多型性，其中42.6%的TRBC1呈阳性，57.4%的TRBC1呈阴性。右: 肿瘤T细胞呈单一型，8.7%的TRBC1细胞呈阳性。（感谢王伟博士供图）

 

关于凯普瑞：

河南凯普瑞生物技术公司成立于2019年4月，但作为公司核心主体、子公司Caprico Biotechnologies，Inc.早已于2013年2月份，在美国亚特兰大成立。河南凯普瑞生物技术有限公司是郑州市高新区重点引进的生物技术企业，注册资金2000万元整，现代化厂房总面积约3000平方米，共有十万级和万级GMP净化车间1700平方米。公司拥有I，II，III类体外诊断试剂完整的生产和质控体系。

河南凯普瑞生物技术有限公司是以临床、科研的流式试剂及配套的流式细胞仪，以及特色荧光染料系统的研发、生产、销售和技术服务为一体的综合性生物技术公司。公司以提供高品质的临床流式试剂为宗旨，推动流式细胞术的基础科学探索、创新临床诊断方法和应用。公司在美国FDA注册，并取得了ISO：9001和ISO：13485标准认证，公司产品已被国际标准认证机构“国际人类白细胞分化抗原会议”(HLDA)验证认可。未来，凯普瑞的产品种类和数量预计将保持每年至少15株单克隆杂交瘤细胞株和至少100种高标准流式试剂的高增长速度，继续为流式检测领域提供更多高品质的流式试剂产品。

截止2021年6月，公司拥有原料杂交瘤细胞株300余株，流式抗体试剂1800余种品规，标准化耦联超过20种不同类型的荧光标记，能够满足流式临床的需要。公司取得570余个一类产品注册备案证，正办理2个二类、5个三类产品注册证。公司已受理发明专利4项，获得实用新型专利10项。 

凯普瑞生物有二十余位行业专家构建的强大科研专家团队，其中教授6人，博士10余人。公司每年研发费用占公司成本的50%以上，有TRBC1、Flaer、PD-1等特色流式试剂。从克隆株原料、抗体原料、荧光素原料、技术服务、多品种、高质量的产品，等多方面承担国产替代进口的历史使命，推动和引领流式行业的革命和进步。