Takara Bio mRNA体外合成及修饰酶，助力mRNA疫苗研发生产

疫情之下，疫苗产业的发展备受关注。

Moderna、Pfizer联合BioNTech率先利用mRNA技术成功研制了针对新冠病毒的预防性疫苗。业内广泛注意到mRNA技术的巨大潜力。一时间，“mRNA疫苗”热度一飞冲天。

2022年初，国家多部门联合发布《“十四五”医药工业发展规划》，多个章节对新型疫苗的研发与产业化做出了规划指导。如专栏3中指出“1. 新型疫苗研发和产业化能力建设。紧跟疫苗技术发展趋势，基于对新发、突发传染病需求，支持建设新型病毒载体疫苗、脱氧核糖核酸疫苗（DNA）疫苗、信使核糖核酸（mRNA）疫苗、疫苗新佐剂和新型递送系统等技术平台，推动相关产品的开发和产业化。”

2020年8月，国家药监局药审中心发布多项新冠病毒预防用疫苗研究相关技术指导原则，其中包括针对mRNA疫苗药学研究的技术指导原则。众多国内企业与科研单位积极投入到这一新技术平台的研究与开发工作之中，国产mRNA新冠疫苗开发工作快速推进，多家企业已进入到临床研究阶段，用于更多适应症范围的mRNA疫苗也在积极的布局之中。

国内新冠病毒mRNA疫苗进展概况

（截至2022年11月1日）

※以上信息来自各企业官网、Clinicaltrials.gov网站、中国临床试验注册中心

Takara Bio作为先进的生物技术企业，从基础研究到创新生物药开发等领域，都可以向生物技术研究和产业支援提供支持。在基因工程疫苗研究领域，Takara Bio提供多种研究解决方案，如重组蛋白疫苗、腺病毒载体疫苗等。应对当前备受关注的mRNA核酸疫苗研究与开发，Takara Bio已推出丰富的研究工具及原料酶，并持续推进现有产品的升级与新品开发工作，助力疫苗产业快速化发展。

▶ 模板DNA制备——限制性内切酶

限制性内切酶对生产者的质量保证水平要求非常高，需要严格有效的质量控制与管理。近30年来，Takara限制性内切酶一直是中国生物科研工作者的理想选择，倍受用户信赖。

◆ BspQⅠ（Code No. 1227），常规限制酶系列

识别位点

◆ XbaⅠ（Code No. 1093），常规限制酶系列

识别位点

◆ QuickCut™ XbaⅠ（Code No. 1634），5～10 min快速高效完成质粒DNA酶切

除以上列举之外，Takara可以提供超过90种常规限制酶、超过30种QuickCut™快速内切酶，丰富用户选择。

▶ mRNA体外转录

Takara提供用于mRNA体外转录所需的多种产品，包括高质量RNA聚合酶、RNA酶抑制剂、RNA修饰酶等各种高效研究产品。

◆ T7 RNA Polymerase ver.2.0（Code No. 2541）

T7 RNA Polymerase ver.2.0识别典型T7启动子序列。转录起始位点（+1位置）的碱基设置为“G”时，有助于高效合成RNA。

T7启动子序列和转录起点

和早期产品T7 RNA Polymerase（Code No. 2540）相比，T7 RNA Polymerase ver.2.0 （Code No. 2541）RNA合成能力得到升级，性能更强！

20 μl反应体系下，FLuc RNA（约1.9 kb）合成产量比较

▶ mRNA修饰

◆ Vaccinia Capping Enzyme（Code No. 2460） ——牛痘加帽酶

真核生物mRNA帽结构对于mRNA稳定性、出核转运、翻译等起到重要作用。该酶及配套buffer与SAM、GTP一并提供，高效完成体外mRNA Cap0帽结构添加。

◆ mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase（Code No. 2470） ——mRNA Cap 2氧甲基转移酶

该酶可以特异性甲基化5’端具有7-甲基鸟苷帽结构的RNA第一个核苷酸的2’-O，产生Cap 1 RNA。研究已发现mRNA Cap1 结构有助于抑制体内先天免疫应答，并促进翻译过程。该酶还可以与Vaccinia Capping Enzyme（Code No. 2460）一起使用，一步反应高效完成RNA 5’帽结构添加及Cap1形成。

◆ Poly(A) Polymerase（Code No. 2181） ——多聚腺苷酸聚合酶

真核生物mRNA 3’ Poly(A)结构有助于保持mRNA自身的稳定性，防止意外降解。该酶以ATP作底物，可以催化各种单链RNA 3’末端A碱基聚合反应。

ATP的掺入个数和时间的关系

体系条件：1 mM ATP作底物，15 U Poly(A) Polymerase，84 μg RNA

▶ 方便，快捷的mRNA体外合成试剂盒——Takara IVTpro™

◆ Takara IVTpro™ mRNA Synthesis System（Code No. 6141）

IVTpro™ mRNA合成系统可以帮助用户方便快捷地完成从模板DNA制备到RNA体外合成及产物纯化等各步骤流程。

模块一，Cloning Kit for mRNA Template（Code No. 6143）提供预线性化质粒用于模板质粒DNA制备，T7启动子序列、Poly(A)尾等元件已预先设计于质粒载体上，帮助简化前期复杂的设计工作。该模块同时包含Takara In-Fusion无缝克隆试剂，进一步加速靶标序列的克隆连接。

模块二，Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit（Code No. 6144）提供独立包装的T7 RNA Polymerase ver.2.0、单管分装的NTPs，以及模板消化、RNA产物纯化所需的DNaseⅠ、LiCl溶液。

选择帽类似物共转录方式或加帽酶方式，均可以使用IVTpro™ mRNA合成系统进行mRNA体外合成。

无加帽和共转录加帽条件下，Fluc-mRNA合成产量比较

注：荧光素酶对照模板（FLuc），20 μl反应体系；模块中不包含Cap类似物，需单独准备；CleanCap Reagent AG (3’OMe)（N-7413，TriLink公司Cap1类似物）

质粒模板制备

• 常规限制性内切酶

• QuickCut™快速内切酶

体外转录

病毒核酸提取与检测

针对疫苗研发、核酸药物等mRNA应用领域的工业客户，我们准备了多项产品的试用活动。扫描下方二维码在试用申请问卷中，写下您的试用需求，我们会尽快与您联系！试用活动细则说明请见试用申请问卷。

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电话：010-80720993

试用申请问卷

参考资料：

[1]《“十四五”医药工业发展规划》

[2] Self-amplifying RNA vaccines for infectious diseases. DOI: 10.1038/s41434-020-00204-y

[3] Lyophilized mRNA-lipid nanoparticle vaccines with long-term stability and high antigenicity against SARS-CoV-2 bioRxiv, 10.1101/2022.02.10.479867

[4] Circular RNA: An emerging frontier in RNA therapeutic targets, RNA therapeutics, and mRNA vaccines. DOI: 10.1016/j.jconrel.2022.05.043

[5] Circular RNA Vaccines against SARS-CoV-2 and Emerging Variants. DOI: 10.1016/j.cell.2022.03.044

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Takara Bio中国有两家公司——宝生物工程（大连）有限公司和宝日医生物技术（北京）有限公司。宝生物工程（大连）有限公司是Takara Bio Inc. 在中国的生产基地，宝日医生物技术（北京）有限公司负责Takara Bio Inc.旗下所有品牌在中国市场的宣传及销售。

宝日医生物技术（北京）有限公司成立于2004年1月，公司主要销售生物工程研究用试剂和仪器（包括Takara、Clontech、Cellartis品牌），产品主要包括PCR/qPCR、基因克隆、基因功能研究、蛋白质功能研究、二代测序、干细胞研究等产品及服务，并可提供客户定制化服务。还开展以细胞治疗为中心的生物工程领域的技术开发与服务，销售细胞治疗和基因治疗相关产品。

咨询热线：4006518761，4006518769

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