BD FACSAria助力中国首个获批本土新冠治疗性抗体药物的研发!

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关键词: 研发获批
资讯来源:生物制品圈
发布时间: 2021-12-16

上周(12月8日),国家药品监督管理局应急批准腾盛华创新冠病毒中和抗体联合治疗药物安巴韦单抗注射液(BRII-196)及罗米司韦单抗注射液(BRII-198)注册申请。该联合疗法是国内迎来的首款新冠病毒中和抗体药物,在国际多中心试验中展现了优异的安全性和有效性,在变异株感染中也显示了良好的治疗效果。


BD FACSAria-高灵敏度的单细胞分选平台

回溯该药物的研发历程(Nature,2020),清华大学医学院、清华大学全球健康与传染病研究中心、艾滋病综合研究中心张林琦教授、深圳市第三人民医院张政教授在新冠爆发初期,率团队从康复病人单个B淋巴细胞中分离了200多株具有高效中和能力的单克隆抗体。BD FACSAria 流式细胞分选仪被用于病毒特异性B细胞的single cell sorting,以进行SARS-CoV-2特异性中和性抗体的筛选分离。



研发技术路线





01

SARS-CoV-2 RBD 特异性的单个B细胞分离

02

单细胞抗体克隆及序列分析

03

重组单克隆抗体与RBD结合能力评估

04

通过抗体结构解析探索病毒阻断机制

精英抗体进行下游临床试验


1

SARS-CoV-2 RBD 特异性的单个B细胞分离


8名新冠康复者血样,首先进行血浆抗体反应,发现识别SARS-CoV-2受体结合区域(RBD)的抗体与SARS-CoV和MERS-CoV之间无交叉反应。使用6个特异性标记的流式染色方案和RBD探针, 上机BD FACSAria,检测到识别荧光受体结合域(RBD)探针的B细胞,将单个B细胞分选至96孔板中进行下游PCR、获取抗体序列。


RBD特异性的B细胞标记方案和圈门分选策略


2

单细胞抗体克隆及序列分析


通过单个B细胞技术,分离了206个特异性靶向RBD的单克隆抗体,获得配对的重链和轻链序列,发现不同感染者抗体扩增和应答多样。



3

重组单克隆抗体与RBD结合能力评估


结果显示部分抗体与ACE2存在竞争关系;筛选出三株强病毒抑制率抗体:P2C-1F11、 P2B-2F6、 P2C-1A3 (IC50 0.03, 0.41 and 0.28 μg ml)



4

通过抗体结构解析探索病毒阻断机制


通过P2B-2F6的解析,发现抗体结合产生的空间位阻可以抑制病毒RBD与ACE2的结合,从而阻断病毒的感染靶细胞。




流式分选在单B细胞抗体药发现中的应用

在单B细胞抗体筛选技术中,准确获得单个B细胞是抗体筛选成功的前提。而抗原特异性B细胞往往含量低,在此项研究中,特异性Memory B细胞在不同样本中仅占比0.092-0.73%



研究人员使用的BD FACSAria分选型流式细胞仪,具有多参数、超高灵敏度的特点,能更清晰地解析胞群,非常适合稀有目的细胞的精准筛选。同时,它也是目前市面上分选速度最快的分选系统,可在短时间内对大量细胞进行筛选,同时能最大程度保证细胞活性。结合单细胞分选模块以及Index sorting功能,可以快速准确的将单个目的细胞分选到孔板中进行后续功能验证,并且对孔板里的单细胞溯源。


总体来说,利用BD FACSAria分选流式细胞仪进行抗体筛选,能保证高分选纯度和活性,还能大幅度节省样本,节省人力物力,有助于加速整体抗体开发进程。



安巴韦单抗/罗米司韦单抗作为本土首款抗新冠的“特效药”,从研发到获批,仅仅历时20个月。在优异临床转化成果的背后,是研发团队的日夜兼程、辛苦付出。在研发初期,碧迪医疗整体解决方案团队也提供了力所能及的技术支持,帮助设定实验参数,及时解决分选过程中遇到的各种问题,保证了仪器的正常运转和实验的顺利进行。碧迪医疗非常荣幸能够以优质的产品和服务,支持此次本土新药的开发过程,也期待未来能够助力更多中国生物医药研发!


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